Region Syddanmark omfatter de tidligere Fyns, Ribe og Sønderjyllands amter, samt de nåværende kommuner Børkop, Egtved, Fredericia, Give, Jelling, Kolding, Lunderskov, Vamdrup og Vejle i det tidligere Vejle Amt. Regionen har sentral forvaltning og sete for det folkevalgte Regionsrådet i Vejle. Det endelige navn og område ble fastsatt i lov av 24. juni 2005.
Følgende 22 kommuner ligger i region Syddanmark:
Varde, Billund, Vejle, Fanø, Esbjerg, Vejen, Kolding, Fredericia, Haderslev, Tønder,Aabenraa, Sønderborg, Middelfart, Nordfyn, Assens, Odense, Kerteminde, Faaborg-Midtfyn, Nyborg, Svedborg, Ærø og Langeland.